🟡 Оптический флуоресцентный подсчет тромбоцитов Оптический подсчет тромбоцитов — это параметр, определяемый в RET-канале автоматизированных гематологических анализаторов. Этот метод основан на использовании полупроводниковых лазеров в сочетании с флуоресцентными красителями (полиметинами), которые избирательно окрашивают РНК и ДНК внутри клеток.
В процессе анализа клетки облучаются лазером определенной длины волны, что позволяет регистрировать три вида сигналов:
Прямое рассеяние (FSC, Forward Scatter) — отражает размер клетки. Боковое рассеяние (SSC, Side Scatter) — характеризует размер и количество внутриклеточных структур. Боковую флуоресценцию (SFL, Side Fluorescence) — указывает на содержание нуклеиновых кислот. Тромбоциты содержат небольшое количество нуклеиновых кислот, что делает их более флуоресцентными по сравнению со зрелыми эритроцитами. При этом они значительно меньше по объему, чем эритроциты, что позволяет легко их дифференцировать на диаграммах рассеяния. Теоретически оптический метод способен детектировать тромбоциты любых размеров.
Интерпретация диаграммы рассеяния Оптический метод позволяет различать следующие популяции клеток:
PLT-O (оптические тромбоциты) IPF (незрелые тромбоциты) RBC-O (оптические эритроциты) RET (ретикулированные эритроциты) LFR (ретикулированные эритроциты с низкой флуоресценцией) MFR (ретикулированные эритроциты со средней флуоресценцией) HFR (ретикулированные эритроциты с высокой флуоресценцией) Преимущества метода Оптический метод эффективно устраняет помехи, возникающие из-за:
мелких эритроцитов, фрагментов эритроцитов, крупных тромбоцитов. Некоторые современные гематологические анализаторы также оснащены технологией дезагрегации PLT, что дополнительно повышает точность подсчета тромбоцитов.
Источник: Chen, Yong, Hu, Yonggang and Hu, Hai. “Advances and challenges in platelet counting: evolving from traditional microscopy to modern flow cytometry” Journal of Laboratory Medicine, vol. 49, no. 1, 2025, pp. 2-13.
