Лабораторные методики

Приготовление препаратов ворсин хориона для кариотипирования

Этапы подготовки клеток ворсин хориона для кариотипирования: гипотония, колхицин, механический цитолиз и окрашивание метафазных пластинок.

Скопление хромосом в метафазной пластинке (фото 2) в препарате для кариотипирования, приготовленном из ворсин хориона (фото 1). Окрашивание по Романовскому. Визуализация хромосом происходит путём обработки ворсин различными методами:

  1. Замачивание в гипотоническом растворе цитрата натрия - способствует мацерации (набуханию) клеток.
  2. Обработка колхицином - разрушение нитей веретена деления, вследствие чего митоз в клетке останавливается на стадии метафазы.
  3. Механический цитолиз - после фиксации из клеток “вытряхивают” хромосомы лёгким постукиванием ворсины о стекло в капле 60% уксусной кислоты с помощью пинцета, само стекло перед этим прогревается на электрической плитке до 50 градусов по Цельсию.
  4. Протеолиз межклеточных соединений и диссоциация клеток - достигается за счёт обработки высушенного препарата трипсином непосредственно перед окраской, таким образом, клетки отделяются друг от друга, что является необходимым критерием для проведения цитогенетического анализа. 🙏 Материалом любезно поделился медицинский лабораторный техник Елисей Жигулёв г. Ульяновск, перинатальный центр.